مقایسه اندازه بدن و هورمون های استروئیدی فیل ماهی (Huso hus) ماده براساس وضعیت اکوژنسیته گناد در سونوگرافی

نویسندگان

• رقیه بهره ور ¹ 
• محمد رضا قمی  ² 
• مهدی سهراب نژاد ³

¹ دانشجوی دکتری تکثیر و پرورش آبزیان، دانشگاه آزاد اسلامی واحد تنکابن، ایران.

² دانشیارگروه شیلات، دانشگاه آزاد اسلامی واحد تنکابن، ایران.

³ دکتری تکثیر و پرورش آبزیان، مرکز پرورش ماهیان خاویاری آبزی گستران ساری، ایران.

چکیدهزمینه و هدف:فیلماهی از مهم­ترین گونه های با ارزش ماهیان خاویاری می­باشد. آگاهیاز کیفیت گناد،لازمه موفقیت در امر پرورش و تکثیر این ماهی است.تحقیق حاضر با هدف بررسی اختلاف طول، وزن و هورمون های استروئیدی براساس اکوژنسیته مشاهده شده از گناد در سونوگرافی، بر روی 20 قطعه فیل ماهی پرورشی 4 ساله ماده انجام پذیرفت.
روش کار:ماهیان مورد زیستسنجی و آنالیز خونی قرارگرفتند.جهت سونوگرافی از دستگاه SonoAce R3 با فرکانس 8-9 مگا هرتز استفاده و سنجش هورمونی به روشرادیوایمنوواسی انجام شد.
یافته ها:میانگین وزن کل، طول کل و طول استاندارد به ترتیب 96/9 کیلوگرم، 45/114 سانتی متر، 65 /101 سانتی متر و میانگین هورمون های 17بتا-استرادیول،تستوسترون، 17آلفا-20بتا-دی هیدروکسیپروژسترون، به ترتیب 49/0، 28/0 و 7/41 نانوگرم بر میلی لیتر به دست آمد. نتایج نشان داد که بین میانگین پارامترهای مورفومتریک در رنگ های مختلف گناد در مشاهدات سونوگرافی، اختلاف معناداری وجود نداشت(05/0p>) ولی بین میانگین آن ها با توجه به حجم های مختلف گناد در مشاهدات سونوگرافی، اختلاف معنادار بوده(05/0p<) به طوری که ماهیان با میانگین بیشتری از پارامترهای مورفومتریک، حجم گناد خوبی را در مشاهدات سونوگرافی نشان دادند. بین میانگین هورمون ها به تفکیک حجم و رنگ گناد، اختلاف معنادارنبوده است(05/0p>).
نتیجه­گیری:با توجه به این که ماهیان بزرگ­تر از حجم گناد مطلوب در مشاهدات سونوگرافی برخوردار بودند، لذا جداسازی و نگهداری ماهیان درشت تر در سن پائین برای تبدیل به مولد جهت جلوگیری از اتلاف وقت و هزینه می تواند سودمند باشد. هم چنین سنجش هورمون در این سن، نمی تواند در بررسی وضعیت اکوژنسیته گناد موثر واقع گردد.

کلیدواژه‌ها

• فیل ماهی پرورشی 
• اولتراسونوگرافی 
• اکوژنسیته گناد 
• اندازه بدن 
• هورمون های استروئیدی

---

عنوان مقاله [English]

Comparison of Body Size and Steroid Hormones of Female Beluga Sturgeon Huso huso Based on Gonad Echogenicity Status in Sonography

نویسندگان [English]

• roghieh bahrevar ¹ 
• mohammad reza ghomi ² 
• mehdi Sohrabnezhad ³

¹ Department of Fisheries, Tonekabon branch, Islamic Azad University, Tonekabon, Iran.² Department of Fisheries, Tonekabon branch, Islamic Azad University, Tonekabon, Iran.³ Saee Sturgeons Aquaculture Co., Sari, Mazandaran, Iran.چکیده [English]

Inroduction & Objective: Beluga sturgeon(Huso huso) is one of the most valuable species of sturgeon for breeding and rearing in aquaculture farms. Understanding the quality of gonads, especially gonads in female, is essential to the success of breeding and reproducing. The purpose of this study was to investigate the differences in body size (length and weight) and steroid hormones based on the echogenicity (volume and color) observed from gonad in ultrasound on 4-year-old female beluga sturgeon (n=20)
Material and Method: For this purpose, the fish were bio-assayed and blood analyzed. The SonoAce R3 was used for ultrasound by adjusting the frequency between 8-9 Hz, hormonal assay was performed by radioimmunoassay (RIA).
Results: Mean total weight (TW), total length (TL), standard length (SL), condition factor (CF) of fish were 9.96 kg, 114.45 cm, 101.65 cm, 0.93 and mean of E2, T and 17,20OH-P were 0.49, 0.28 and 41.7 ng/ml, respectively. The results of one-way ANOVA showed that there was no significant difference between the mean of morphometric parameters in different gonadal colors in sonographic observations (p> 0.05). However, there was a significant difference between their mean values with respect to different gonad volumes in the ultrasound observations (p<0.05) whereas fish with a higher average of total weight, total length, standard length, and condition factor showed good gonad volume in the ultrasound observations. There was also no significant difference between mean values of steroid hormones in terms of volume and color of gonad (p> 0.05).
Conclusion: Since the larger fish had a favorable gonad volume in the ultrasound observations, thus, separation and maintenance of such stocks for reproduction is more desired and reduces costs. Also steroid hormones in 4-year-old female beluga are not associated with gonadal echogenicity characteristics and cannot be used as a determination method.

کلیدواژه‌ها [English]

• Cultured Beluga Sturgeon 
• Ultrasonography 
• Gonad Echogenicity 
• Body Size 
• Steroid Hormones

مقدمه

فیل ماهی یا بلوگا بزرگ­ترین ماهی آب شیرین(21) شناخته شده است و هم­چنین گران بها ترین نوع خاویار تاس ماهیان به این گونه تعلق دارد(1). ضریب رشد فیل ماهی در مقایسه با سایر ماهیان خاویاری بالاتر و لارو آن با هزینه کمتری تولید می­شود(4). از لحاظ رشد غددجنسی نیز، فیل ماهی از ازون برون پیشی می­گیرد(2). بنابراین، این ماهی، چه از نقطه نظر بازسازی ذخایر طبیعی و چه تولید خاویار، بسیار ارزشمند می­باشد. اما متاسفانه جمعیت این گونه ماهی همانند سایر گونه­های ماهیان خاویاری به دلایل گوناگون نظیر صید بی رویه، آلودگی منابع زیستگاهی وآب­ها، تخریب مناطق طبیعی تخم­ریزی و فعالیت­های انسانی در معرض انقراض قرار دارد. از این رو پرورش و تکثیر این ماهیان به صورت مصنوعی بسیار حائز اهمیت خواهد بود. هدف نهایی از پرورش ماهیان خاویاری از جمله فیل ماهی، استحصال خاویار است. اما از آن­جایی که دوره پرورش تا تولید خاویار حدود 8 تا 10سال طول می­کشد، لذا جهت افزایش تولید در حداقل زمان و مکان ممکن، توجه به رشد ماهیان به خصوص ماهیان ماده در سنین پایین­تر، ضروری است. چرا که خروج هرچه سریع­تر نرها و هم­چنین ماده های با رشد کم از چرخه پرورش، برای مدیریت بهتر پرورش و انتخاب مولدین کارآمدتر و جلوگیری از اتلاف وقت و هزینه می­تواند مفید باشد. محققین رشد را به دو دسته تقسیم می کنند: رشد سوماتیک که شامل رشد تمامی قسمت های بدن به جز اندام های جنسی است و رشدگنادی که همان بلوغ جنسی می باشد که افزایش سایز بدن و حتی بلوغ جنسی در گرو رشد سوماتیک ماهیان می باشد(7). در ماهیان سایز بدن عامل تعیین کننده بلوغ است. لذا توجه به این رشد در ماهیان، امری حیاتی است و سبب افزایش راندمان تولید گوشت و خاویار می گردد. یکی از روش­های نوین بررسی وضعیت رشد گناد ماهیان، روش اولتراسونوگرافی است. روش سونوگرافی یک روش سریع و غیر تهاجمی می باشد. تصاویر حاصل از سونوگرافی می تواند در تعیین جنسیت، تشخیص مشکلات تغذیه ای، چربی در اطراف گنادها، کیست ها، مرحله رسیدگی جنسی، سطح مقطع و کیفیت گناد موثر واقع شود(5). از طرف دیگر شاخص های خونی و یا فعالیت های هورمونی گنادها در ماهیان استخوانی، نقش مهمی در رشد و رسیدگی گناد ماهیان دارند(30). یکی از حیاتی ترین بخش بدن جانداران خون است. آگاهی از وضعیت خونی ماهیان خاویاری می تواند متخصصان را در پیشبرد اهداف حفظ، تکثیر، نگهداری و پرورش این ماهیان یاری نماید(7). مقدار شاخص های خون و یا هورمون های استروئیدی در مراحل مختلف رشد متفاوت خواهد بود. برای مثال افزایش سطوح پلاسمایی 17بتا-استرادیول (E₂) و 17آلفا-20بتا-دی هیدروکسی پروژسترون(17a,20bOH-P  در طی روند بلوغ در بسیاری از ماهیان استخوانی گزارش شده است(29،32) و تستوسترون(T  نیز به عنوان یک آندروژن قوی، در رشد و نمو جنسی ماهیان حتی ماهیان ماده نقش به سزایی دارد(3) و به عنوان پیش ساز E₂ مطرح می باشد(11،18). تفاوت در غلظت استروئیدهای پلاسما در مراحل مختلف بلوغ، مجالی ایجاد نموده تا از این استروئیدها در تعیین مراحل مختلف رشد گنادی استفاده شود(33). در این راستا، مطالعه حاضر به بررسی اختلاف اندازه بدن و هورمون­های استروئیدی براساس اکوژنسیته(حجم و رنگ) مشاهده شده گناد در سونوگرافی پرداخته است. به بیان دیگر باید دانست که آیا اندازه و سطح هورمون های ماهی می تواند با مشاهدات سونوگرافی در ارتباط باشد یا خیر. آیا ماهی بزرگ تر و با سطح هورمونی بالاتر، گناد قوی­تری را نیز داراست یا خیر. لذا دانش و آگاهی درباره اندازه ظاهری ماهی در کنار بررسی هورمونی و بررسی اکوژنسیته گنادها و پی بردن به ارتباطشان با هم، که هدف اصلی از انجام این تحقیق است، می تواند باعث سهولت توسعه روش های کنترل تولید مثل فیلماهی در کارگاه های تکثیر و هم چنین پرورش مولدین کارآمدتر گردد.

مواد و روش ها

تهیه و آماده سازی نمونه ها

 در این بررسی، تعداد 20 قطعه فیلماهی ماده چهار ساله متعلق به مزرعه پرورش شرکت آبزی گستران ساعی واقع در شهر ساری در نظرگرفته شد. تمامی نمونه ها متعلق به یک تکثیر بوده و از 4 استخر مختلف بتنی هشت وجهی به صورت کاملاً تصادفی انتخاب شدند. میانگین سالانه دما در این استخرها برابر 3± 18درجه سانتی گراد، pH برابر 02/0±6/7 و عمق استخرهای سیمانی 5/1 متر ثبت گردید. ماهیان توسط ساچوک صید و در وان پلاستیکی قرار داده شدند و پودر گل میخک به میزان 8/0 گرم بر لیتر جهت بیهوش کردن ماهیان، به آن اضافه شد. ماهیان در مدت زمان تقریبی 10 دقیقه بیهوش شدند.

زیست سنجی

ماهیان به صورت تک به تک، توسط ترازوی دیجیتال مارکAND  مدل SK20KI با دقت 1/0 گرم در خارج از آب وزن کشی شدند. طول کل )نوک پوزه تا انتهای بالایی باله دمی( و طول استاندارد )نوک پوزه تا شکاف باله دمی از داخل)  توسط متر اندازه گیری شد. سپس برای هر ماهی فاکتور وضعیت(CF) طبق رابطه 1 محاسبه شد(9).

رابطه 1: CF = (W / L3) × 100

W: وزن ماهی )گرم(؛L : طول ماهی )سانتی متر).

اولتراسونوگرافی

جهت سونوگرافی ماهیان از دستگاه سونوگرافی SonoAce R3 با ترانسفورماتور خطی و تنظیم فرکانس بین 8-9 مگا هرتز(MHz) استفاده شد(8). در ماهیان کوچک­تر، فرکانس ترنس دیوسر باید بیشتر باشد، زیرا گناد این ماهیان به مراتب کوچک تر از ماهیان بالغ یا در حال بلوغ است و همین امر وضوح بیشتر تصویر را ایجاب می کند(8). در مطالعه حاضر، تصاویر سونوگرافی در دو نمای عرضی و طولی با قرار دادن ترانس دیوسر در دو سمت راست و چپ محوطه شکمی از خلف باله های سینه ای تهیه شدند. امواج دستگاه بعد از برخورد به بافت گنادی و برگشت توسط دستگاه دریافت و بر روی مانیتور شکل بافت نشان داده شد. دستگاه سونوگرافی استفاده شده دارای حافظه داخلی بوده است. لذا تصاویر به صورت دیجیتالی ذخیره و سپس به فلش مموری منتقل شدند.

سنجش هورمون های استروئیدی

به منظور سنجش هورمون های استروئیدی، سطح بدن ماهیان به وسیله پارچه ای خشک شده و نمونه های خون به میزان 5 سی سی از سیاهرگ وریدی از قسمت پشت باله مخرجی برداشته و جهت جداسازی سرم، داخل لوله­های سرولوژی حاوی هپارین شماره گزاری شده، ریخته شد. سپس با استفاده از سانتریفوژ با دور 3000 دور در دقیقه به مدت 5 دقیقه سرم جدا و با سمپلر در ظروف اپندروف تخلیه و در مجاورت یخ به آزمایشگاه انتقال و درشرایط فریزر(در دمای20-درجه سانتی گراد) تا انجام آزمایش نگهداری شد(24). ml2/0 از سرم نمونه‌ های فراهم شده جهت انجام آزمایش مورد نیاز بوده است. برای سنجش هورمون های E₂ و 17a,20bOH-P و  Tاز روش رادیوایمنوواسی (R.I.A)(36) و کیت مخصوص سنجش هورمون Hangzhou Estbiopharm co. LTD;Hangzhoui)) ساخت کشور چین استفاده شده است. در روش RIA حداکثر پرتودهی در کم­ترین غلظت(غلظت استاندارد صفر) وکم­ترین پرتودهی در بیشترین غلظت(آخرین استاندارد تعریف شده) به دست می آید(3).

روش آماری

جهت تجزیه و تحلیل نتایج، از نرم افزار SPSS 16 استفاده شد و از روش آنالیز واریانس یک­طرفه برای مقایسه میانگین ها و آزمون دانکن در سطح(05/0p<) جهت انجام تجزیه و تحلیل و نتیجه گیری نهایی استفاده شد.

نتایج

نتایج حاصل از اندازه گیری طول، وزن و مقادیر هورمونی در جدول 1 ارائه شده است. مطابق با این جدول، میانگین وزن کل، طول کل، طول استاندارد و فاکتور وضعیت ماهیان به ترتیب 96/9 کیلوگرم، 45/114سانتی متر، 65/101 سانتی متر و 93/0 درصد بوده است. حداقل، حداکثر، میانگین مقدار E₂ به ترتیب 36/0، 68/0، 49/0 نانوگرم بر میلی لیتر و حداقل، حداکثر، و میانگین مقدار T به ترتیب 26/0، 32/0، 28/0 نانوگرم بر میلی لیتر و حداقل، حداکثر، و میانگین مقدار 17a,20bOH-P به ترتیب 5/34، 7/53، 7/41 نانوگرم بر میلی لیتر اندازه گیری شد. ماهیان ماده 4ساله، در مرحله دوم رسیدگی جنسی قرار داشتند. این مرحله از طولانی­ترین مراحل رسیدگی جنسی است که ممکن است از 2تا10سال ادامه یابد(10، 8). تصاویر گرفته شده از این ماهیان در سونوگرافی نشان می دهد که تخمدان در سطح چربی تخمدانی قرار گرفته و دارای شکل نامنظم و بدون لبه واضح می باشد و ساختار آن ناهمگن است(شکل 1). در مرحله II، بافت های چربی شروع به رشد کرده و به تدریج تخمدان را تشکیل می دهند. میزان بافت چربی غدد جنسی در این مرحله کم بوده اما در اواخر این مرحله بر میزان بافت چربی افزوده خواهد شد. در شکل 1 تصویر سونوگرافی مربوط به تعدادی از نمونه­های مورد آزمایش نشان داده شده است. در تصاویر مربوط به برخی از نمونه ها، حجم و رنگ گناد با هم رابطه مستقیم نداشتند. برای مثال گناد از حجم خوبی برخوردار بوده ولی شدت رنگ آن ضعیف بوده است(شکل 1-الف) و در برخی دیگر کیفیت رنگ و حجم گناد مطلوب نبوده است(شکل 1-ب). در برخی نمونه ها نیز، گناد از شدت رنگ و حجم خوبی برخورداربوده است(شکل 1-ج) نتایج آنالیز واریانس یک طرفه برای مقایسه میانگین پارامترهای مورفومتریک(وزن کل، طول کل، طول استاندارد، فاکتور وضعیت) و هورمون های استروئیدی(T،E_2، 17a,20bOH-P) در فیل ماهیان ماده 4ساله براساس رنگ و حجم گناد در مشاهدات سونوگرافی در جدول 2 و 3 ارائه شده است. نتایج نشان می دهند که بین مقادیر میانگین هریک از پارامترهای مورفومتریک در رنگ­های مختلف گناد اختلاف معناداری وجود ندارد(05/0p>)(جدول 2) ولی بین مقادیر میانگین پارامترهای مورفومتریک با توجه به حجم های مختلف گناد اختلاف معنادار است(5 0/0p< )(جدول 3). به طوری که در نمونه های دارای حجم گناد خوب در تصاویر سونوگرافی، میانگین وزن کل، طول کل، طول استاندارد و فاکتور وضعیت بیشتر بوده است. هم چنین بین مقادیر میانگین هورمون های استروئیدی به تفکیک حجم و رنگ گناد نیز اختلاف معناداری وجود ندارد(05/0p>). این موضوع در نمودار 1 نیز به خوبی نشان داده شده است. هرچند بر اساس این نمودار تفاوت مقدار هورمون 17a,20bOH-P در حالت های مختلف اکوژنسیته گناد، بیشتراز دو هورمون دیگر است.17a,20bOH-P ، بیشترین مقدار خود را زمانی داراست که گناد در تصاویر سونوگرافی با کیفیت رنگ ضعیف و حجم متوسط دیده می شود.

جدول1- نتایج حاصل از اندازه گیری پارامترهای مورفومتریک و مقادیر هورمونی در فیلماهیان ماده 4ساله

میانگین	دامنه	تعداد	نام فاکتور
2/9 ± 46/96	80/16-9/6	20	وزن(Kg )
82/8±45/114	00/131-00/102	20	طول کل (cm)
92/7±65/101	00/118-00/91	20	طول استاندارد (cm)
0/±0 08/93	23/1-83/0	20	فاکتوروضعیت (%)
0/±0 08/49	68/0-36/0	20	(ng/ml) E2
0/±0 01/28	32/0-26/0	20	(ng/ml) T
64/4±7/41	7/53-5/34	20	(ng/ml) 17a,20bOH-P

شکل 1- الف: تصویر سونوگرافی مربوط به تخمدان نمونه 3 که از حجم خوبی برخوردار است ولی شدت رنگ در آن ضعیف است. ب: تصویر سونوگرافی مربوط به تخمدان نمونه10 که حجم و رنگ آن ضعیف دیده میشود. ج: تصویر سونوگرافی مربوط به تخمدان نمونه 12 که از حجم و رنگ خوبی برخوردار است.

جدول 2- میانگین پارامترهای مورفومتریک و هورمون های استروئیدی در فیلماهیان ماده 4ساله براساس رنگ گناد*

رنگ گناد   فاکتور رشد	ضعیف	متوسط	خوب
میانگین وزن کل(kg )	a2/9 ± 26/31	a2/10 ± 84/37	a2/10 ± 57/49
میانگین طول کل (cm)	a58/9±77/111	a37/7±40/116	a91/9±75/117
میانگین طول استاندارد (cm)	a39/8±0/99	a54/7±57/103	a58/7±25/104
میانگین فاکتور وضعیت(%)	a0/0 ± 11/94	a 0/0 ± 06/93	a 0/0 ± 04/89
(ng/ml) E2	a 0/0 ± 10/50	a 0/0 ± 07/45	a 0/0 ± 04/51
(ng/ml) T	a 0/0 ± 01/28	a 0/0 ± 29	a 0/0 ± 01/28
(ng/ml) 17a,20bOH-P	a 6/42 ± 24/88	a 2/40 ± 55/82	a 2/41 ± 5/96

*اعداد داخل جدول، به صورت انحراف استاندارد ± میانگین هستند. در هر سطر، تیمارهایی که با یک حرف مشخص شده­اند در سطح 05/0 اختلاف معناداری با یکدیگر ندارند.

جدول 3- میانگین پارامترهای مورفومتریک و هورمون های استروییدی در فیلماهیان ماده 4 ساله براساس حجم گناد

حجم گناد   فاکتور رشد	ضعیف	متوسط	خوب
میانگین وزن کل(kg )	b1/9 ± 35/76	b3/8 ± 56/84	a1/11 ±  21/36
میانگین طول کل (cm)	b19/9±50/113	b95/8±85/108	a35/7±18/121
میانگین طول استاندارد (cm)	b00/4±24/98	b71/9±48/96	a90/5±90/104
میانگین فاکتور وضعیت (%)	b0/0 ± 98/50	b 0/0 ± 90/60	a 0/0 ± 93/10
(ng/ml) E2	a 0/0 ± 03/45	a 00/0 ± 11/50	a 0/0 ± 07/49
(ng/ml) T	a 0/0 ± 29	a 0/0 ± 01/28	a 0/0 ± 01/28
(ng/ml) 17a,20bOH-P	a 70/6±00/39	a 81/5±74/43	a 94/3±90/40

*اعداد داخل جدول، به صورت انحراف استاندارد ± میانگین هستند. در هر سطر، تیمارهایی که با یک حرف مشخص شده­اند در سطح 05/0 اختلاف معناداری با یکدیگر ندارند.

                                                  ب                                                                                              الف

نمودار 1- روند تغییرات­ هورمون های استروئیدی در حجم های مختلف

 گناد (الف) وکیفیت رنگهای مختلف گناد (ب) در مشاهدات سونوگرافی

بحث و نتیجه گیری

تصاویر گرفته شده از ماهیان نشان داد که شکل لایه لایه یا تاخورده تخمدان که در سونوگرافی ماهیان خاویاری بالغ وجود دارد(8)، در فیلماهیان چهار ساله ماده که در مرحله دوم جنسی قرار داشتند، دیده نشد. تخمدان دارای شکل نامنظم و بدون لبه واضح با ساختار ناهمگن بوده است و نسبت به چربی اطراف آن روشن­تر بوده و چربی با اکوژنسیته کم(هیپواکوئیک) در اطراف توده تخمدان قراردارد. مشاهدات ما مطابق با بررسی های مقیم و همکاران(2002) برروی گونه Acipenser stellatus بوده است(28). به طور کلی نتایج مشاهدات در سونوگرافی گونه­های مختلف ماهیان خاویاری تقریبا یکسان میباشد(37، 34، 28، 27، 17، 14). لازم به ذکر است، به عنوان یک استثنا، برخی از تخمدان ها، نمای هیپواکوئیک(تیره) تر ازخود نشان دادند که این مشاهدات نیز مطابق با مطالعات وجهی و همکاران(1390) می باشد که بیان نمودند گاهی تخمدان برخی از ماهیان تیره تر دیده می شود که حتی ممکن است در صورت عدم دقت با تصویر بیضه اشتباه گرفته شود(8). البته باید توجه داشت که توانایی شناسایی تصویر به فاکتورهای دیگری مثل شرایط و نحوه پرورش نیز بستگی دارد(5). مقدار هر دو هورمون T وE₂  در نمونه های آزمایش ناچیز بود که علت آن را می توان قرار داشتن ماهیان در سن پائین و مراحل ابتدایی رسیدگی جنسی بیان کرد. چرا که تحقیقات نشان داده که در جنس ماده با پیشرفت مرحله رسیدگی جنسی مقدارتستوسترون افزایش می یابد. مثلاً در گزارشی مقدار آن در ماهیانی که تخمک های آن ها در مرحله IV رسیدگی جنسی بودند، اختلاف معنی داری با مقدار آن در ماهیانی که تخمک های آن ها در مراحل ما قبل بودند، داشت(6). فیست و همکاران(2004) دریافتند که در جمعیت نر تاسماهیان سفید که در مرحله II قرار داشتند، میزان T بالاتر از 2 نانوگرم در میلی لیتر بوده است. در حالی که در ماهیان ماده ای که در سن مشابه و در کنار این ماهیان نر پرورش داده شده بودند، مشابه تحقیق حاضر، مقدار T کمتر از 2 نانوگرم در میلی لیتر بوده است(22). اسمعیل­نیا و همکاران(2019)، نیز سطوح مختلف هورمون های استروئیدی در بچه فیلماهیان را مورد بررسی قرار دادند که مشابه مطالعه حاضر، مقادیر هورمون T ناچیز بوده و بالاترین مقدار آن در ماهیان نر و ماده، به ترتیب 7/4 و 2/1 نانوگرم در میلی لیتر به دست آمد(20). در مطالعات دیگر غلظت هورمون تستوسترون در مولدین بالغ نسبت به مولدین نابالغ و کوچک تر بیش تر گزارش شد یعنی غلظت این هورمون در هر دو جنس در طی فرآیند گامتوژنزیز افزایش، اما پس ازرسیدگی جنسی نهایی و تخم ریزی و اسپرم ریزی به شدت کاهش می یابد(11،23). گنادوتروپین در سلو ل های لایه تکا تولید یک نوع استروئید به نام 17 آلفا – هیدروکسی پروژسترون می­کند. استروئید فوق در لایه فولیکولی گرانولوزا تحت تأثیر آنزیم 20β-hydroxysteroid-dehydrogenase قرار گرفته و تبدیل به هورمون 17آلفا- 20 بتا -دی هیدروکسی پروژسترون می گردد(31). پروژستین ها از هورمون های اصلی جنسی در جنس ماده می باشند و مقدار این هورمون نسبت به دو هورمون دیگر به طور قابل ملاحظه ای بیشتر مشاهده شد که می تواند به دلیل وجود روند فعالیت های آنزیمی و استروئیدزایی باشد(3). اسمعیل نیا و همکاران(2019) نیز مقدار این هورمون را در بچه فیلماهیان ماده بیشتر از نرها بیان کردند(20). در مطالعه حاضر، این هورمون بیشترین مقدار خود را زمانی دارا بوده است که گناد در تصاویر سونوگرافی با کیفیت رنگ ضعیف و حجم متوسط دیده شد. اختلافات در مورد طول و وزن ماهیان نیز، می تواند نشان دهنده وضعیت متفاوت تغذیه ای در آنان باشد که به میزان غذای مصرفی هر یک بستگی داشته و یا عواملی چون محیط در آن دخالت دارند(3). اختلاف بین هورمون های استروئیدی و اندازه ماهی براساس مشاهدات سونوگرافی موضوع تازه ای است که تاکنون به آن پرداخته نشده است. در اکثر مطالعات پیشین، اختلاف روش سونوگرافی و هورمون های استروئیدی، صرفاً در تعیین جنسیت مورد بررسی قرار گرفته است و از بررسی غلظت هورمون های استروئیدی یا شاخص های خونی در تعیین جنسیت گونه های مختلف ماهیان خاویاری استفاده شده است(16،19،23،36). در مطالعه حاضر، اختلاف بین مقادیر هورمونی با اکوژنسیته گناد در مشاهدات سونوگرافی(حجم و رنگ گناد) معنادار نبوده است و می توان نتیجه گرفت که اگرچه سطح هورمون T که پایه بسیاری از هورمون های استروئیدی در سطوح بالاتر است و نیز سطحE₂  در هر دو جنس نر و ماده، می تواند به عنوان هورمون های شاخص در جداسازی جنسیت و مراحل رسیدگی جنسی مورد استفاده قرار گیرند (23،25،35،38)، اما از آنجایی که در ماهیان ماده 4ساله سطوح استروئیدهای جنسی بسیار پایین است و بلوغ جنسی با افزایش سطوح پلاسمایی این هورمون ها همراه می باشد، بنابراین نمی توان اختلاف معناداری را بین میزان هورمون های استروئیدی خون براساس اکوژنسیته مشاهده شده از گناد در تصاویر سونوگرافی یافت و سنجش هورمون در این سن، نمی تواند در بررسی وضعیت اکوژنسیته گناد موثر واقع گردد. مطالعات ملک زاده ویایه و همکاران(2000) بر روی فیلماهی نشان داده که که از شاخص های ریخت سنجی می توان برای تمایز جنسی و بررسی گنادی استفاده کرد(26). بریگان و چبانو(2000) نیز مطالعات زیادی در مورد رابطه بین بلوغ گنادها با شاخص های رشد مثل ارتباط طول با سن بلوغ انجام دادند و ارتباط معنادار بین وضعیت گنادها و طول کل را تائید نمودند(12). در مطالعه حاضر، بین اندازه ماهیان در حجم های مختلف مشاهده شده از گناد در سونوگرافی، اختلاف معنادار وجود داشته است و براساس مشاهدات سونوگرافی، ماهیان با وزن و طول بیشتر، حجم گناد بیشتری را دارا بودند. بنابر این، می­توان نتیجه گرفت که جداسازی و نگهداری ماهیان درشت تر در سن پائین برای تبدیل به مولد جهت جلوگیری از اتلاف وقت و هزینه می تواند سودمند باشد. چبانوو و همکاران(2009)، نیز سونوگرافی را جهت ارزیابی اثر به گزینی در برنامه های تولیدمثلی برای نژاد های ماهیان خاویاری مفید تلقی نمودند(15). استفاده از این روش سریع میتواند به خصوص برای مولدین وحشی(28) و انتخاب اولیه ماهیان خاویاری نابالغ که برای اهلی سازی مقدماتی در نظر گرفته می شوند، مفید باشد(13).